Introducción: Las variantes patogénicas del gen GJB2 están asociadas a las hipoacusias aisladas o no sindrómicas autosómicas recesivas, y son que las que aparecen en mayor proporción en el humano; entre ellas la más común es la c.35delG. En la población cubana existe evidencias de la presencia de otras mutaciones de este gen: c.427C>T, c.94C>T y c.139G>T, detectadas a través de secuenciación Sanger, que es cara y laboriosa. Se requiere disponer de técnicas más simples y de menor costo para su diagnóstico. Objetivo: diseñar y validar técnicas de PCR alelo específico, para detectar las variantes: c.427C>T, c.94C>T, y c.139G>T del gen GJB2. Materiales y métodos: Los cebadores se diseñaron con el programa bioinformático WASP y analizados con la herramienta informática NetPrimer; se aplicaron el resto de las condiciones habituales en el diseño del PCR. En la validación fueron empleadas 10 muestras de pacientes previamente genotipificados, cinco con al menos una de las tres variantes de interés, e igual número homocigóticos para la c35delG. Resultados: Los cebadores diseñados para identificar estas variantes reunieron las características recomendadas para su uso, pues cumplieron los parámetros de calidad y especificidad predeterminados por el programa bioinformático WASP. La predicción cuantitativa de la eficiencia de los cebadores según el programa NetPrimer estuvo entre 75 y 100. A través del análisis del diagnóstico previo, se obtuvo que las técnicas diseñadas tuvieron una sensibilidad y especificidad del 100%. Conclusiones: Los métodos PCR-ARMS descritos permiten detectar las variantes: c.427C>T, c.94C>T, y c.139G>T del gen GJB2.